A型流感病毒通用型熒光PCR檢測試劑盒

A型流感病毒通用型熒光PCR檢測試劑盒簡(jiǎn)介：

【產(chǎn)品名稱(chēng)】

通用名稱(chēng)：A型流感病毒通用型熒光PCR檢測試劑盒

Name：Influenza A virus universal fluorescent PCR detection kit

【包裝規格】50T/盒

【預期用途】

本試劑盒適用于檢測氣管分泌物拭子、肺組織等樣本中的A型流感病毒，用于A型流感病毒感染的輔助診斷，其檢測結果僅供參考。

【檢驗原理】

本試劑盒采用 TaqMan 探針?lè )▽?shí)時(shí)熒光 PCR 技術(shù)，設計一對A型流感病毒特異性引物，結合一條特異

性探針，用熒光 PCR 技術(shù)對A型流感病毒的 DNA 進(jìn)行體外擴增檢測，用于臨床上對可疑感染者的病原學(xué)

診斷。

【試劑組成】

說(shuō)明：不同批號的試劑盒組分不可交互使用。

【儲存條件及有效期】

-20℃±5℃，避光保存、運輸、反復凍融次數不超過(guò) 5 次，有效期 12 個(gè)月。

【適用儀器】

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

PCR技術(shù)，即聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction，PCR）是由美國PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年（1993年獲諾貝爾化學(xué)獎）建立的。這項技術(shù)可在試管內的經(jīng)數小時(shí)反應就將特定的DNA片段擴增數百萬(wàn)倍，這種迅速獲取大量單一核酸片段的技術(shù)在分子生物學(xué)研究中具有舉足輕重的意義，極大地推動(dòng)了生命科學(xué)的研究進(jìn)展。它不僅是DNA分析常用的技術(shù)，而且在DNA重組與表達、基因結構分析和功能檢測中具有重要的應用價(jià)值。

PCR可以被認為是與發(fā)生在細胞內的DNA復制過(guò)程相似的技術(shù)，其結果都是以原來(lái)的DNA為模板產(chǎn)生新的互補DNA片段。細胞中DNA的復制是一個(gè)非常復雜的過(guò)程。參與復制的有多種因素。PCR是在試管中進(jìn)行的DNA復制反應，基本原理與細胞內DNA復制相似，但反應體系相對較簡(jiǎn)單。

PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應步驟構成：①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時(shí)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結合，為下輪反應做準備；

②模板DNA與引物的退火(復性)：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合；

③引物的延伸：DNA模板--引物結合物在Taq酶的作用下，以dNTP為反應原料，靶序列為模板，按堿基配對與半保留復制原理，合成一條新的與模板DNA 鏈互補的半保留復制鏈。

重復循環(huán)變性--退火--延伸三過(guò)程，就可獲得更多的“半保留復制鏈"，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需2～4分鐘， 2～3小時(shí)就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬(wàn)倍。

【注意事項】

1.所有操作嚴格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行；

2.試劑盒內各種組分使用前應自然融化，*混勻并短暫離心；

3.反應液應避光保存；

4.反應中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊；

5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區專(zhuān)用工作服；

6.樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區進(jìn)行，以免交叉污染；

7.實(shí)驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器；

8.試劑盒里所有物品應視為污染物對待，并按照《微生物生物醫學(xué)實(shí)驗室生物安全通則》進(jìn)行處理。